Inicio


Publicación

ESTANDARIZACIÓN DE UN PROTOCOLO DE EXTRACCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DEL MATERIAL PROTEICO DEL ESMALTE DENTAL ERUPCIONADO


Información de la publicación

Información de la publicación
Tipo de publicación

Científica

Tipología

Investigación y estudios

Medio de publicación

Impreso: Revista de divulgación científica

Resumen

El 95% del peso del esmalte dental erup-cionado sano corresponde a material inorgánico, 4% agua y 1% a materia orgánica (con un 0,03 a 0,1% de trazas de proteínas estructurales). En el caso del esmalte con defectos del desarrollo - como la fluorosis dental - existe evidencia de la retención de material proteico, despertando la necesidad del estudio del proteoma del esmalte en estas condiciones. Limitaciones inherentes a los tejidos duros, como su bajo contenido proteico ence-rrado en una matriz mineral, dificultan los procesos de extracción y caracterización de proteínas. El presente estudio, busca hacer una adaptación metodológica de los procedimientos de extracción de proteínas en esmalte dental erupcionado humano, para su posible aplicación al estudio del proteoma del esmalte con defectos del desarrollo.

Objetivo: Estandarizar una técnica de extracción y carac-terización del material proteico del esmalte de dientes erupcionados. Materiales y métodos: Se recolectaron dientes sanos con extracción indicada y se realizaron: -cortes de secciones longitudinales de 550 μm, - separación mecánica de esmalte/dentina y - pulverización de esmalte dental. El pulverizado se sometió a desmineralización/precipita-ción de proteínas con TCA 12%. El extracto fue separado por electroforesis SDS-PAGE y caracterizado por LC-MS/ MS. Resultados: el procedimiento fue estandarizado. No se evidenciaron bandas de proteína después de la electro-foresis SDS-PAGE, pero se identificaron y caracterizaron 138 péptidos, correspondientes a 13 proteínas, 3 de ellas específicas del esmalte (Amelogenina X, Amelogenina Y, Ameloblastina). Conclusiones: por primera vez en Colombia, se estandarizan y se adaptan métodos de extracción y caracterización de proteínas del esmalte dental, abriendo las puertas al estudio del proteoma de este tejido.

 

Autores

Gina Castiblanco. Leopold Ilag. Jaime Castellanos. Stefania Martignon. Wilson Mejía.

Registro ISSN

2248-5759

Fecha de publicación 16 de enero de 2015
Fecha de aceptación 16 de enero de 2015
Medio indexado (nombre)

Revista salud bosque

English information
Title

Standardization of a protocolo of extraction and characterizacion of erupted dental enamel proteins

Abstract

95% of erupted enamel corresponds to inorganic material, 1% organic and 4% water content (by weight) and it only has traces of structural proteins (0,03–0,1%), making extraction and characterization a difficult process. Enamel developmental defects as dental fluorosis, have been related to protein retention, indica-ting a clear need for the study of the enamel proteome. Standardization of methods for extraction and characteri-zation of enamel proteins will allow the characterization of the human enamel proteome under these particular conditions. Methods: ethical approval from Universidad El Bosque ethics committee was granted and informed consent was given. Human permanent erupted teeth were collected from Universidad El Bosque Dental Clinics. The teeth crowns were cut in 550 μm sections, and dental tissues were separated. The enamel sections were grinded with liquid nitrogen to get enamel powder. Powdered enamel was demineralized and the proteins precipitated with TCA 12%. The proteins were separated by SDS-PAGE Electrophoresis and characterized by LC-MS/MS. Results: enamel powdering and protein extraction tech-niques were standardized at Universidad El Bosque laboratories. No protein bands were detected after SDS- PAGE Electrophoresis, however, by LC-MS/MS, 138 peptides from 13 proteins were identified, 3 of them enamel-specific (Amelogenin X, Amelogenin Y). Conclusions: for the first time in Colombia, methods for extraction and characterization of proteins are standar-dized and applied on dental enamel, opening the doors for the study of the proteome from sound and defective dental enamel.

Keywords

dental enamel, dental enamel proteins, proteome, mass spectrometry

Información de contacto

Contacto de Publicaciones